MLPA​ – Amplificación de sondas tras ligación múltiple

Descripción general

Informes y resultados

Hay dos resultados posibles que pueden obtenerse con un test de MLPA:

• Positivo (patogénico y probablemente patogénico): Un resultado positivo indica que se ha identificado una deleción o duplicación génicas en conexión con el fenotipo de enfermedad bajo estudio. Este escenario permitirá ofrecer asesoramiento genético u orientación personal sobre posibles tratamientos médicos, la progresión de la enfermedad, las estrategias reproductivas o de prevención y las implicaciones potenciales para otros miembros de la familia.
• Negativo: Un resultado negativo indica que no se han identificado deleciones o duplicaciones causantes de enfermedad en la prueba realizada. Esto no garantiza que la persona esté sana o no tenga otros trastornos genéticos o médicos. Además, un resultado negativo no descarta una causa genética de la enfermedad ni elimina el riesgo para la futura descendencia. No obstante, si se obtiene un resultado negativo en la prueba y se sabe que la variante en cuestión está presente en miembros familiares afectados, esto descarta un diagnóstico de ese trastorno genético en el sujeto de prueba. Un resultado negativo puede explicarse por varias causas, incluidos un conocimiento genético limitado y limitaciones asociadas a la metodología utilizada.

Requisitos de muestras

• Las pruebas genéticas de Igenomix aceptan los siguientes tipos de muestras.
• Se sugiere realizar un etiquetado meticuloso del tubo con información de identificación única; un etiquetado incorrecto puede causar el rechazo de la muestra. La información mínima requerida para identificar y aceptar una muestra es: nombre completo del paciente, fecha de nacimiento, sexo y número de expediente médico.

Para diagnóstico prenatal:

• Se recomienda contactar previamente con el laboratorio para preparar adecuadamente el caso y los plazos prenatales y anticipar posibles inconvenientes.
• La muestra de sangre materna debe enviarse con todas las muestras de productos de concepción, VC y amnióticas.
• Se dará prioridad a todas las muestras prenatales.

El formulario de consentimiento informado y el formulario de solicitud del test (incluidos en el kit suministrado) deben cumplimentarse debidamente, llevar la firma del paciente y enviarse con las muestras en la caja de envío o por correo electrónico al laboratorio. Igenomix le enviará todos los documentos necesarios para la recogida y el transporte del kit correspondiente a nuestro laboratorio.

Metodología

Limitaciones

El MLPA no puede detectar

• Reordenamientos cromosómicos equilibrados.
• Deleciones y duplicaciones teloméricas.
• Deleciones y duplicaciones que quedan fuera del alcance de las sondas de MLPA utilizadas.
• Mutaciones puntuales, inserciones y deleciones pequeñas.
• Repeticiones secuenciales o mutaciones en el ADN mitocondrial
• La sensibilidad analítica y la especificidad del método de MLPA son del 99 %.

Pueden darse resultados positivos o negativos debido a variantes de secuencia poco habituales en regiones objetivo detectadas por las sondas de MLPA.  Una mutación o un polimorfismo puntuales en la secuencia detectada por una sonda, que dan lugar a una menor eficiencia de ligación de la sonda, también pueden causar una reducción del área de pico relativa. Por tanto, las deleciones de exones individuales detectadas por el MLPA siempre deben confirmarse con otros métodos, como PCR múltiple o secuenciación.